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色谱检测器/紫外检测器/蒸发光检测器
功能

    将被分析组在柱流出液中浓度的变化转化为光学或电学信号。

紫外检测器

    仪器工作原理的依据是光吸收定律。从光源发出的光经狭缝、滤光片、样品池到光电培增管上,使束由于样品浓度不同所引起光强的变化转换成光电流的变化,此光电流经放大器输入到对数转换器,使透光率T转成A输出,即A=1g — =εCL式中ε为待测样品的克分子消光系统,C为样品浓度,采用克分子/升单位,L为光程,用厘米作单位。根据上式就知测出了A,就知样品浓度C。若从放大器直接输入记录仪,绘出的是样品透光率T变化的图谱,若从对数转换器输入到记录仪绘出的是样品光密度A变化的图谱。
    优点:紫外吸收检测器不仅灵敏度高、噪音低、线性范围宽、有较好的选择性,而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感,因此既可用于等度洗脱,也可用于梯度洗脱。紫外检测器对流速和温度均不敏感,可于制备色谱。由于灵敏高,因此即使是那些光吸收小、消光系数低的物质也可用UV检测器进行微量分析。
    缺点:不足之处在于对紫外吸收差的化合物如不含不饱和键的烃类等灵敏度很低。

 

光电二极管阵列检测器(PAD或DAD)

    普通的UV-Vis检测器只能测定某一波长时吸光度与时间关系曲线,即只能作二维图谱。要测定某组分的紫外可见吸收光谱图,需采用“停留扫描”的方法,PAD能够同时测定吸光度、时间、波长三者的关系,通过计算机处理,可以得到三维图谱,也可做出任意波长的吸光度-时间曲线(色谱图)和任意时间的吸光度-波长曲线(紫外可见光谱图)。PAD的一个重要用途是峰纯度检验。

示差折光检测器(RID)

    RID也称光折射检测器,是一种通用型检测器。基于连续测定色谱柱流出物光折射率的变化而用于测定溶质浓度。溶液的光折射率是溶剂(流动相)和溶质各自的折射率乘以其物质的浓度之和,溶有样品的流动相和流动相本身之间光折射率之差即表示样品在流动相中的浓度。原则上凡是与流动相光折射率有差别的样品都可用它来测定。其检测限可达10-6-10-7g/mL,一般不能用于梯度分析。

蒸发光散射检测器(ELSD)

    ELSD是一种质量型检测器,它可以用来检测任何不挥发性化合物,包括氨基酸、脂肪酸、糖类、表面活性剂等,尤其对一些较难分析的样品,如磷脂、皂苷、生物碱、甾族化合物等无紫外吸收或紫外末端吸收的化合物更具有其他HPLC检测器无法比拟的优越性。此外,ELSD对流动相的组成不敏感,可以用于梯度洗脱。ELSD的检测灵敏度要高于低波长紫外检测器和示差折光检测器,检测限可低至于10-10g。

荧光检测器(FLD)

    许多化合物,特别是芳香族化合物、生化物质,如有机胺、维生素、激素、酶等被入射的紫外光照射后,能吸收一定波长的光,使原子中的某些电子从基态中的最低振动能级跃迁到较高电子能态的某些振动能级,之后,由于电子在分子中的碰撞,消耗一定的能量而下降到第一电子激发态的最低振动能级,再跃迁回到基态中的某些不同振动能级,同时发射出比原来所吸收的光频率较低、波长较长的光,即荧光。被这些物质吸收的光称为激发光(λex),产生的荧光称为发射光(λem)。荧光的强度与入射光强度、量子效率、样品浓度成正比。FLD的最大优点是的高灵敏度和良好的选择性。一般来说,它比紫外吸收检测器的灵敏度要高10-1000倍,可达mg/L级,而且它所需要的试样很少,因此在药物和生化分析中有着广泛的用途。

电导检测器(CD)

    CD是离子色谱中使用最广泛的检测器,其原理是用两个对电极测量水溶液中离子型溶质的电导,由电导的变化测定淋洗液中溶质浓度。这种检测器的死体积小,如采用抑制电导法,其灵敏度可达10-8g/mL,线性动态范围为103。

安培检测器(AD)

    AD采用固体工作电极,电极可用于较高的正电位,故能检测氧化还原性物质,适用范围很宽。AD结构简单,池体积小,响应快,噪声低,灵敏度高。但是由于电极表面容易被污染,需要经常抛光更新。AD有直流、脉冲和积分之分,也是离子色谱常用的检测器之一。

质谱检测器(MSD)

    一般是指HPLC-MS或HPLC-MS/MS等联用,通常作为结构测定或化合物鉴定等使用。有极高的灵敏度和分辨率。目前流行的接口是电喷雾离子化(ESI)和大气压化学电离(APCI),并有正负二种离子方式,应用范围极其广泛。其它HPLC检测器还有:化学反应检测器也就是将被检物质进行某种化学反应(衍生反应,酶反应等)后再用高灵敏度的某种检测器检测。如氨基酸分析仪,固相化学反应检测器(固定化酶反应器)等。

 

介电常数检测器

    介电常数检测器是一种通用型检测器,灵敏度低,通用性强。其工作原理是:随流动相中流出组分的改变,其介电常数、电容量也改变,因此测定流动相的电容量变化,即可检测组分的变化。介电常数检测器性能类似于RID,但其应用不如后者普遍。

电位测定检测器

    电位测定检测器利用离子选择电极测定流出液的电位,流出液组成改变,电位也发生变化。使用不同的离子选择电极(如卤离子电极,银离子电极等)可测定不同的离子浓度变化情况。

放射性检测器

    放射性检测器是一种检测流动相中有放射性标记组分的特殊检测器。其响应范围很宽,对没放射性的流动相成分的改变不敏感,可有效地使用梯度洗脱技术。

光电导检测器

    光电导检测器是利用某些化合物受强烈紫外光照射引起光电离形成离子的现象,在电导池中检测。这种检测器对卤代物和许多含硫和氮的光敏化合物有选择性响应。光电导检测器对某些化合物的灵敏度比紫外-可见光吸收检测器还高,两者线性范围相当。

红外光谱检测器

    红外检测器可用作HPLC的选择性检测。这种方法主要用于凝胶色谱,且只能用于流动相对所用红外波长没有吸收的体系。目前应用较多的是傅里叶变换红外光谱检测器,即HPLC-FTIR联用,由于扫描速度快,不用停留就可以得到每一个色谱峰的红外光谱图。

库仑阵列电化学检测器

    库仑阵列电化学是一种新型的检测器,灵敏度非常高(10-15),用于测定电化学活性物质,可得到三维的色谱图(时间、电势、浓度)。

 

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