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基因导入仪、细胞融合仪
技术背景与用途

    基因导入仪,是把外源基因转移到真核或原核细胞的仪器。

    20世纪70年代,DNA重组技术的出现为人类愿望的实现提供了可能。在获得符合要求的基因之后,面临的是如何将基因导人所选择的细胞中,并使之稳定表达,出现所期望的遗传性状。其中,基因导人是关键的环节之一。随着动植物基因工程研究的相继开展,先后出现了化学介导、生物介导和物理介导等类型方法。在物理介导法中,有激光打孔、电击孔和基因枪等方法。

    基因导入仪广泛应用于各种动物、植物细胞和微生物的电穿孔,也可作细胞杂交、融合、基因导入的研究。

基因枪法介绍

    基因枪法,又称粒子轰击(particle bombardment),高速粒子喷射技术(High-velocity particle microprojection)或基因枪轰击技术(gene gun bombardment),是由美国Cornell大学生物化学系John.C.Sanford等于1983年研究成功。主要适用于单子叶植物。但转化效率较低。

    基因枪根据动力系统可分为火药引爆、高压放电和压缩气体驱动三类。其基本原理是通过动力系统将带有基因的金属颗粒(金粒或钨粒),将DNA吸附在表面,以一定的速度射进植物细胞,由于小颗粒穿透力强,故不需除去细胞壁和细胞膜而进入基因组,从而实现稳定转化的目的。它具有应用面广,方法简单,转化时间短,转化频率高,实验费用较低等优点。对于农杆菌不能感染的植物,采用该方法可打破载体法的局限。基因枪的转化频率与受体种类、微弹大小、轰击压力、制止盘与金颗粒的距离、受体预处理、受体轰击后培养有直接关系。

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