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色谱填料
色谱填料粒度选择要点

    目前,商品化的色谱料粒度从1μm到超过30μm均有销售,而目前分析分离主要用3、5和10μm填料,填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3μm的填料应用,在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是唯一的因素。如果固定相选择是真确,但是分离度不够,那么选择更小粒度的填料是很用有的,3μm填料填充柱的柱数比相同条件下的5μm填料的柱效提高近30%;然而;3μm的色相谱的背压却是5μm的2倍。与此同时,柱效提高意味着在相同条件下可以选择更短的色谱柱,以缩短分析时间,另外,可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色谱柱的压力。

如何保证良好的柱性能与柱寿命

    1、 认证阅读色谱柱使用说明书;
    2、 使用填充良好的色谱柱;
    3、 尽量减少压力波动,避免机械及热冲击;
    4、 使用保护柱及在线过滤器;
    5、 经常以强溶剂冲洗色谱柱;
    6、 充分过滤样品及流动相,尽量避免杂质微粒与保强留分成;
    7、 用稳定的固定相(C18最稳定);
    8、 在中等PH纸操作(6~8),用有机年成液溶;
    9、 色谱柱使用温度最好小于400C;
    10、硅胶基质的的色谱柱,应保持流动相的PH值范围在3.0~8.0;
    11、在水流动相与缓冲浓液中加200ppm的叠氮钠;
    12、流动相中含有缓冲溶液,应注意应95:5的水及有机溶剂过渡,有机溶剂不能低于5%;
    13、过夜或储存时,冲洗掉盐和缓冲液,用纯有机溶剂流动相保存(乙晴最好)。

美国药典(USP)规定的色谱柱编号对应填料表
USP编号填料/说明简称
L1十八烷基键合多孔硅胶或无机氧化物微粒固定相ODS柱
L230~50μm表面多孔薄壳型键合十八烷基固定相C18柱
L3多孔硅胶微粒,即一般的硅胶柱 
L430~50μm表面多孔薄壳型硅胶柱 
L530~50μm表面多孔薄壳型氧化铝柱 
L630~50μm实心微球表面包覆磺化碳氟聚合物,强阳离子交换柱 
L7全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相C8柱
L8全多孔硅胶微粒键合非交联NH2固定相3 to 10μmNH2
L9强酸性阳离子交换基团键合全多孔不规则形硅胶固定相SCX柱
L10多孔硅胶微球键合氰基固定相(CN)CN柱
L11键合苯基多孔硅胶微球固定相苯基柱
L12无孔微球键合季胺功能团的强阴离子交换柱 
L13三乙基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相(C1)C1柱
L1410μm硅胶化学键合强碱性季铵盐阴离子交换固定相SAX柱
L15已基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相C6柱
L16二甲基硅烷化学键合全多孔硅胶微粒固定相C2柱
L17氢型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,强阳离子交换柱 
L183~10μm全多孔硅胶化学键合胺基(NH2)和氰基(CN)柱 
L19钙型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,强阳离子交换柱 
L20二羟基丙烷基化学键合多孔硅胶微球固定相(Diol)二醇基柱
L21刚性苯乙烯-二乙烯基苯共聚物微球填料柱 
L22带有磺酸基团的多孔苯乙烯阳离子交换柱 
L23带有季胺基团的聚甲基丙烯酸甲酯或聚丙烯酸酯多孔离子交换柱 
L24表面含有大量羟基的半刚性聚乙烯醇亲水凝胶柱 
L25聚甲基丙烯酸酯树脂交联羟基醚(表面含有残余羧基功能团)树脂。能分离分子量 100~5000范围的水溶性中性、阳离子型及阴离子型聚合物(用聚氧 乙烯测定)的固定相 
L26丁基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相C4柱
L2730~50μm的全多孔硅胶微粒 
L28多功能载体,100Å的高纯硅胶加以氨基键合以及C8反相键合的官能团 
L29氧化铝,反相键合,含碳量低,氧化铝基聚丁二稀小球,5μ m,孔径80Å 
L30全多孔硅胶键合乙基硅烷固定相 
L31季胺基改性孔径2000Å的交联苯乙烯和二乙烯基苯(55%)强阴离子交换树脂 
L32L-脯氨酸铜配合物共价键合于不规则形硅胶微粒的配位体的交换手性色谱填料 
L33能够分离分子量4000~40000范围蛋白质分子的球形硅胶固定相, pH稳定性好 
L34铅型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物强阳离子交换树脂,9mm球形 
L35锆稳定的硅胶微球键合二醇基亲水分子单层固定相,孔径150Å 
L365mm胺丙基硅胶键合L-苯基氨基乙酸-3,5-二硝基苯甲酰 
L37适合分离分子量2000~40000的聚甲基丙烯酸酯凝胶 
L38水溶性甲基丙烯酸酯基质SEC色谱柱 
L39亲水全多孔聚羟基甲基丙烯酸酯色谱柱 
L40Tris-3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯纤维素涂覆多孔硅胶微球 
L41球形硅胶表面固定α1酸糖蛋白固定相 
L42C8和C18硅烷化学键合多孔硅胶固定相 
L43硅胶微球键合五氟代苯基固定相 
L44多功能固定相,60Å高纯硅胶基质键合磺酸阳离子交换功能团和C8反相功能团 
L45β-环糊精键合多孔硅胶微球 
L46季胺基改性苯乙烯-二乙烯基苯聚合物微球 

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