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化学发光分析仪
什么是化学发光分析仪

    化学发光分析仪,也叫化学发光免疫分析仪,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。在临床上的使用是通过检测患者血清从而对人体进行免疫分析。化学发光免疫分析仪包含两个部分,即免疫反应系统和化学发光分析系统。

    化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子(hM),利用发光信号测量仪器测量光量子产额。

    免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体)直接标记在抗原(化学发光免疫分析)或抗体(免疫化学发光分析)上,或酶作用于发光底物。


化学发光反应必备条件

    一、是该反应能释放出一定的能量,且释放出的能量可以被某种反应产物或中间体所吸收,使之处于激发态;

    二、是这种激发态产物应具有一定的化学发光量子产率,或者可以将其能量有效地转移给某种荧光物质,产生光辐射。

    基于此,并不是任何化学反应都能产生化学发光反应,因此,如果测量条件适当,化学发光分析会有足够的选择性。


化学发光现象发现历史

    1、最早发现的化学发光现象发生在生物体内,即荧火虫,现在称之为生物发光(Bioluminescence);

    2、到了十九世纪后期人们发现简单的非生物有机化合物也能产生化学发光

    3、1877年,发现洛汾碱(2,4,5-三苯基咪唑)在碱性介质中被过氧化氢等试剂氧化时发出绿色的光;

    4、1928年,观察到鲁米诺(3-氨基苯二甲酰肼)在碱性介质中的化学发光行为;

    5、1935年,第一个报告了光泽精(N,N-二甲基二吖啶硝酸盐)与过氧化氢反应产生化学发光;

    6、到现在的吖啶酯、三联吡啶钌等发光标记物应用技术的成熟。

化学发光分析法的特点

    1、由于化学发光分析不使用任何光源,避免了背景光和杂散光的干扰,降低了噪声,大大提高了信噪比,因而,化学发光分析法一般都有很高的灵敏度,通常可测定纳克级或皮克级的化学成分。

    2、测量化学发光强度,多采用光电转换装置,用函数记录仪或数显装置,记录化学发光的相对强度。以最大发光强度(曲线的峰高)定量被测组分的浓度。

    3、由于流动注射分析(FIA)技术的发展,流动注射化学发光仪也广泛使用。

    4、配备微机系统,自动进样,储存记录,打印结果,使化学发光分析的速度更快。

化学发光反应分类

    化学发光反应参与的免疫测定分为二种类型。

    第一种是以发光剂作为酶免疫测定的底物,通过发光反应增强测定的敏感性。如:化学发光酶免疫测定(CLEIA,与酶标ELISA法类 似,即最后一步酶反应所用底物为发光剂)。

    第二种是以发光剂作为抗体或抗原的标记物,直接通过发光反应检测标本中抗原或抗体的含量。如:化学发光标记免疫测定亦称化学发光免疫测定(CLIA)、电化学发光免疫测定(ECLI)。

化学发光反应分析的物质与发光类型

  化学发光分析测定的物质可以分为三类:第一类物质是化学发光反应中的反应物;第二类物质是化学发光反应中的催化剂、增敏剂或抑制剂;第三类物质是偶合反应中的反应物、催化剂、增敏剂等。这三类物质还可以通过标记方式用来测定其他物质,进一步扩大化学发光分析的应用范围。

  化学发光反应的发光类型通常分为闪光型(flash type)和辉光型(glow type)两种。闪光型发光时间很短,只有零点几秒到几秒。辉光型又称持续型,发光时间从几分钟到几十分钟,或几小时至更久。闪光型的样品必须立即测量,必须配以全自动化的加样及测量仪器。辉光型样品的测量可以使用通用型仪器,也可以配有全自动化仪器。

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