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液相色谱的发展变化介绍
2018.01.05   点击351次

    液相色谱色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。

    1、液固色谱法

    使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或氧化铝,粒度5~10μm。适用于分离分子量200~1000的组分,大多数用于非离子型化合物,离子型化合物易产生拖尾。常用于分离同分异构体。

    2、液相色谱法

    使用将特定的液态物质涂于担体表面,或化学键合于担体表面而形成的固定相,分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离。分离过程是一个分配平衡过程。涂布式固定相应具有良好的惰性;流动相必须预先用固定相饱和,以减少固定相从担体表面流失;温度的变化和不同批号流动相的区别常引起柱子的变化;另外在流动相中存在的固定相也使样品的分离和收集复杂化。由于涂布式固定相很难避免固定液流失,现在已很少采用。现在多采用的是化学键合固定相,如C18、C8、氨基柱、氰基柱和苯基柱。

    液相色谱法的分离机理是基于混合物中各组分对两相亲和力的差别。根据固定相(柱子里装的填料)的不同,液相色谱分为液固色谱、液液色谱和键合相色谱。

    根据固定相的整体外观形式,液相色谱法可以分为柱色谱法、纸色谱法及薄层色谱法。

    按样品与固定相的作用力,可分为吸附色谱、分配色谱、亲和色谱、疏水色谱、离子交换色谱和凝胶渗透色谱等。

    在液相柱色谱系统中加上高压液流系统,使流动相在高压下快速流动,以提高分离效果,因此出现了高效(又称高压)液相色谱(HPLC)法。

    液固色谱,其固定相是一些具有吸附活性的物质如硅胶、氧化铝、分子筛、聚酰胺等。

    液相色谱的发展,涉及键合相,基于被测物质在固定相(含液体)和流动相之间的相对溶解度的差异,通过溶质在两相之间进行分配以实现分离。将固定液机械地涂渍在担体上组成固定相。化学键合固定相。这种固定相是通过化学反应把各种不同的有机基团键合到硅胶(载体)表面的游离羟基上,代替机械涂渍的液体固定相。这不仅避免了液体固定相流失的困扰,还大大改善了固定相的功能,提高了分离的选择性,化学键合色谱适用于分离几乎所有类型的化合物。

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