细胞描述

人白血病T淋巴细胞，Jurkat细胞由Schneider建立，来源于一个14岁的男孩的外周血。该克隆是 Jurkat-FHCRC细胞株的一个克隆（Jurkat的一个衍生株），经佛波酯(phorbol esters)和外源凝集素（lectins）或抗T3单克隆抗体（需要两种物质共同诱导）诱导后可产生大量IL-2。

细胞特性

1） 来源：T淋巴细胞；急性T细胞白血病

2） 形态：淋巴母细胞,悬浮生长

3） 含量：>1x10^6 细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备  1640基础培养基               （iCell-0002）                                 87%

      优质胎牛血清                             （iCell-0500）                                 10%

      GlutaMAX-1谷氨酰胺                  ( iCell-0900 )                                  1%

      Sodium Pyruvate丙酮酸钠             ( iCell-01100 )                               1%

      P/S青霉素-链霉素                       （iCell-15140-122）                       1%

参考传代周期：

不超过300万细胞/ mL，建议将活细胞密度控制在10万-100万/ mL之间参考传代密度：10万活细胞/ mL,参考换液频率：2-3天。

注意：

a）该细胞为悬浮细胞，根据培养经验以及客户的反馈，传代时使用【半换液法】对细胞状态有利，因此我库建议您使用【半换液法】进行传代。同时，您在收到细胞后，请不要通过离心的方式收集细胞，可以直接向培养瓶中添加等体积的新鲜培养液，然后将细胞吹打均匀后移入两个新的T25培养瓶中继续培养即可。

b）该细胞对血清质量较为敏感，建议您使用进口大品牌优质血清进行培养，

培养，传代时请注意保持细胞密度在合适的范围。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

悬浮状态下生长的细胞，可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态，一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL（不同细胞对密度要求不同，）可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm，离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3） 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。