细胞描述

此细胞株源自Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。此细胞株不分泌可检测到的病毒颗粒，XC斑点形成试验阴性。可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖。可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。LPS或PPD处理2天可诱导分解红血球但对肿瘤靶细胞无作用。

细胞特性

1） 来源：鼠科白血病病毒诱导的肿瘤；单核细胞；巨噬细胞

2） 形态：不规则圆形，纺锤状，贴壁细胞，少量悬浮。

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5） 用途：仅供科研使用。

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备DMEM(包含2mM L-谷氨酰胺，0.11g / L丙酮酸钠) (推荐iCell-0001)培养基；优质胎牛血清10 %；P/S青霉素-链霉素 1%。

2） 注意事项：

（a）在细胞生长的初始阶段，细胞以贴壁的形式生长并呈现出长方体的形态和有“伪足”延伸。随着培养时间的增加，细胞呈现圆形并以叠加的形式生长。细胞密度达到一定的程度，会有细胞以悬浮的方式散落到到培养基中，镜下观察会发现悬浮和贴壁的细胞会同时出现。

（b）该细胞传代时不需要用胰酶消化。传代时，用无菌细胞刮刮拭培养表面将细胞刮落，收集离心后重悬接种到新的培养瓶中。

（c）该细胞形态上包含松散贴壁的纺锤形和圆形或者立方形。当细胞密度较大时，细胞会轻微脱落变圆或者许多细胞堆积在一起，有些细胞甚至脱落漂浮。这些漂浮的细胞是存活的，在传代时应收集起来，离心后细胞沉淀可以继续培养。（d）血清质量差异可能引起细胞贴壁能力变化，应选用高质量的胎牛血清。

3） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

4） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞，传代可以参考以下方法：

该细胞用细胞刮铲替代胰酶来对细胞进行处理。用无菌细胞刮铲刮拭细胞附着培养表面将细胞刮落，收集细胞后离心去上清，重悬后接种到新的装有新鲜培养液的培养瓶内。收货后**次传代1:2进行，后续可以根据实际的情况以1:2~1:4的比例进行传代。

3） 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。