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探针法猪肺炎支原体实时定量PCR试剂盒
探针法猪肺炎支原体实时定量PCR试剂盒图片
货号:Mqt-hpn-20
品牌:炎熙生物
参考价格:1280元/盒
包装:20次反应
交货期:现货
产地:上海


产品名称
猪肺炎支原体定量PCR试剂盒
猪肺炎支原体荧光PCR试剂盒
产品介绍

探针法猪肺炎支原体实时定量PCR试剂盒

Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Hyopneumoniae

 

货号:Mqt-hpn-20      规格:20个反应

货号:Mqt-hpn-50      规格:50个反应

货号:Mqt-hpn-100     规格:100个反应

储存:-20度,避光保存,有效期一年。避免反复冻融。

 

试剂盒特点:

1,   特异性检测猪肺炎支原体,与其他生物基因组无交叉反应。

2,   灵敏度高,最低检测极限为反应液中2.5个基因组。

3,   使用热启动的Taq酶,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。

4,   带有阳性对照样品(组分C),可用于检验试剂盒有效性。

5,   带有dUTP和UDG酶,可降低残留DNA的污染。

 

猪肺炎支原体(Mycoplasma Hyopneumoniae)是地方性猪肺炎的主要病原体。猪猪肺炎支原体附着于猪肺上皮细胞的纤毛上,导致纤毛停滞、结块和丢失,最终导致上皮细胞死亡,这是猪肺部损伤病变的原因。这种损害妨碍正常的纤毛清除,并且经常引发继发性感染。猪对猪肺炎支原体的免疫应答缓慢且无效。这种支原体不产生任何特别有害的毒素,但是可观察到一些毒性很小的代谢副产品。肺炎支原体会造成猪发育迟缓,食物转化不良,干咳,对其他生物感染的易感性增加。

对猪肺炎支原体的检测,常采用体外培养法和免疫荧光法。由于猪肺炎支原体生长条件非常挑剔,这两种检测方法有时需要一个月才能完成。由于生长很慢,其他支原体,尤其是猪鼻支原体(Mycoplasma Hyorhinis),常对猪肺炎支原体的培养造成污染,因此培养法很少使用。由于猪免疫系统应答缓慢,血清学检测方法往往无效,而且会与猪鼻支原体和絮状支原体(Mycoplasma flocculare)产生交叉反应。使用PCR法检测,具有更高的灵敏度和特异性,且检测时间短,仅需几个小时即可获得结果。普通PCR实验操作较为繁琐,只能对目标DNA进行定性分析,相比之下,实时定量PCR不仅可以对目标DNA进行定量分析,实验步骤也较为简单,且灵敏度更高,更少受环境污染的影响。

探针法猪肺炎支原体定量PCR试剂盒选取一个粘附蛋白基因作为靶点,经BLAST验证,特异性靶向猪肺炎支原体,与其他生物基因组无交叉反应。使用本试剂盒检测了亲缘关系或分布范围较近的11种支原体和10种细菌,只有猪肺炎支原体可以产生特异性信号,其余均无交叉反应发生。对猪肺炎支原体接种28天后的52个呼吸道拭子和灌洗液样品进行检测,得到51个阳性。本试剂盒适用于猪肺炎支原体的检测和鉴定。

 

本试剂盒包含热启动DNA聚合酶、dNTP(以dUTP代替dTTP)、引物、探针、阳性对照品、ROX染料,和用以防止残余DNA污染的UDG(Uracil- DNA Glycosylase,尿嘧啶-DNA-糖基酶),用户只需准备好DNA样品即可使用。

本试剂盒采用的DNA聚合酶源自极端嗜热菌(Thermus thermophilus),经改造后较普通的Taq酶具有更强的抗抑制能力和热稳定性。通过结合特异性单克隆抗体,在室温下DNA聚合酶活性被抑制。在PCR循环的热变性阶段,抗体受热被去除,此时DNA聚合酶活性恢复,因此获得“热启动”功能。热启动可减少残余DNA的污染,提高PCR扩增效率、灵敏度和目的片段产量。

UDG和dUTP可以阻止前次步骤残余DNA的扩增。dUTP可以确保扩增后的DNA中均含有尿嘧啶。UDG可从单链或双链DNA上去除尿嘧啶残基,从而阻止含有尿嘧啶的DNA作为下几轮PCR的模板。在PCR循环开始前的UDG孵育步骤,可以破坏带有尿嘧啶的PCR产物。经过该去除污染步骤后,UDG在正常的PCR循环过程中被高温灭活,对PCR反应没有影响。



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地址: 上海徐汇大木桥路599弄
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