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FS Mix Direct for tissue
品牌:东盛
产地:广州



包装与价格:
订货号纯度规格包装价格(元)
P2071b40次,50 μl体系/次1 ml200
P2072b200次,50 μl体系/次1 ml×5880
产品名称
FS™ TaqMix Direct for tissue
产品介绍

产品组分:

 P2071b
 2×FSTM Mix T  1ml 1支
 Extraction Solution 10ml 1瓶
 Neutralization Solution 1ml 1支
 超纯水 1ml 1支
 P2072b
 2×FSTM Mix T 1ml 1支×5
 Extraction Solution 40ml 1瓶
 Neutralization Solution 5ml 1瓶
 超纯水 1ml 1支×5

    注: 本产品分含体系中包含溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。体系中包含溴酚蓝的产品,PCR扩增产物可直接电泳检测。这两类产品的扩增性能无差异。如没特别说明提供体系中
包含溴酚蓝的包装。

保存条件
    -20℃保存2年。
    请勿保存于-70℃,防止反复冻融导致酶活降低。
 
产品说明
    FSTM Mix Direct for tissue是适合组织样本扩增的2×浓缩快速高效PCR预混和溶液,含有FSTM Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、缓冲液等PCR扩增必需组分(模板与引物除外)。使用时,仅需在扩增体系中加入简单处理后的样本处理液和引物即可进行PCR,大大简化操作过程,缩短操作时间,降低污染(加样次数减少)。本产品不用进行繁琐费时费钱的DNA提取,最大限度减少实验误差和交叉污染;结果可靠,经检验与DNA扩增产物无异。
    含溴酚蓝染料的PCR产物可直接电泳。
    FSTM Taq DNA 聚合酶 是东盛根据蛋白工程原理,以Taq DNA 聚合酶为基础研发的新型DNA聚合酶。本产品具备类似KOD酶快速扩增能力,延伸速度可达3 kb/min,是普通Taq DNA 聚合酶的3倍,可缩短一半以上的PCR扩增时间。同时具备普通Taq DNA 聚合酶扩增效率高、适应性广等优点。
 
产品特点
    高特异性。
    样品用量节省。
    使用方便:无需繁琐的DNA提取过程,仅需简单处理样本即可进行PCR扩增。
    快速、高效:减少加样步骤,节约时间。
    可重复:降低污染和加样错误风险
 
产品用途
    高特异性组织、细胞样本PCR检测
    高通量组织、细胞样本PCR检测
    高重复性组织、细胞样本PCR检测
    制备TA克隆用的PCR产物
 
活性定义
    一个活性单位(U)指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在72℃、30 min内,摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。
 
质量控制
    相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染;PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因;室温放置一周,扩增活性无明显改变。
 
应用举例
    注:以下反应举例为25 μl标准PCR体系,仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化,确定最佳反应条件。

 处理液上清 0.5μl       
 引物1 (10 μM) 1 μl
 引物2 (10 μM) 1 μl
 2×FSTM Mix B 12.5 μl
 超纯水 补足至25 μl

PCR反应条件
    多数模板的快速扩增条件

 94℃ 4 min
 94℃ 30 sec
 55~68℃ 30 sec  30 Cycles
 72℃ 20 sec
 72℃ 2 min

    1kb简单模板的快速扩增条件

 95℃ 3 min
 95℃ 15 sec
 55~68℃ 15 sec  30 Cycles
 72℃ 20 sec
 72℃ 2 min

    注:由于1 kb简单模板的二级结构简单,且长度较短,可同时缩短变性、退火时间至15 s,以实现快速扩增。
 
注意事项
    1  使用本产品时,引物、模板、dNTPs用量跟普通PCR Mix的一样,为实现快速扩增,请尽量选用小体反应体系。
    2  退火温度一般为TM-5℃或TM-8℃,稍低的退火温度有利于实现快速扩增。
    3  延伸时间视片段长度而定。一般情况,≤500 bp目的片段延伸15 s;500 bp-1 kb目的片段延伸20 s;>1 kb目的片段,延伸时间 按 20s/kb计算,如1.5 kb目的片段延伸30 s、3 kb目的片段延伸60 s。
    4  FSTM Taq DNA聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性,因此在PCR产物3'末端通常会加上一个多余的脱氧腺嘌呤核苷。
    5  建议在冰上配置PCR 反应液后,再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性,减少非特异性扩增,得到良好的PCR结果。
    6  50μl PCR反应体系中模板DNA推荐用量

 人类基因组DNA 0.1μg------1μg
 λDNA               0.5ng--------5ng
 质粒DNA              0.1ng------10ng
 大肠杆菌DNA           10ng-----100ng

 
Q&A
问:使用FSTM Mix Direct for tissue扩增时是否需要使用快速PCR扩增仪?
答:不需要,使用普通的PCR扩增仪即可。
问:FSTM MixDirect for  tissue的使用与普通Taq Mix 有何不同?
答:使用方法与普通PCR Mix 基本相同,只需注意扩增条件中时间适当缩短。
问:FSTM Mix Direct for  tissue扩增产物是否可用于TA克隆?
答:FSTM Taq DNA 聚合酶 没有3-5外切酶活性,所以PCR产物末端带 A,可进行TA克隆。
问:FSTM 系列与KOD系列产品相比有什么区别?
答:KOD有3-5外切酶活性,保真性比较高,但正因为有外切酶活性,容易降解引物及模板,所以其灵敏度及易用性方面不如FSTM Taq。普通检测及基因诊断很少用到KOD酶。

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