动物细胞培养技术的核心在于模拟体内环境，为细胞提供适宜的生存条件。在无菌培养箱中，温度恒定在37℃、CO₂浓度维持在5%，这与哺乳动物内环境高度相似。培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、维生素等营养物质，以及胎牛血清这类天然成分，为细胞生长提供必需的生长因子和激素。

值得注意的是，细胞在体外培养时会出现"接触抑制"现象——当单层细胞铺满培养瓶底时便会停止分裂。这种现象揭示了细胞间信号传导的重要性，也为癌症研究提供了线索，因为癌细胞往往能突破这种抑制机制。现代培养技术已发展出三维培养系统，通过生物支架材料模拟细胞外基质，使细胞能够形成更接近体内的立体结构。