针对猪胰岛素(INS)ELISA检测的特性,以下是完整的洗刷准备操作指南:
一、试剂类准备
试剂盒平衡:提前20分钟从2~8℃冰箱取出试剂盒,放置在实验台上自然平衡至室温,避免低温试剂接触酶标板产生冷凝水,影响后续洗涤效果。
洗涤液配制:取出的20×或30×浓缩洗涤液若出现结晶,属于正常现象,放置室温轻摇或37℃水浴助溶后,按说明书比例用蒸馏水/去离子水稀释,配制成工作浓度的洗涤液,未用完的稀释液可放回4℃短期保存。
试剂核对:提前核对试剂盒内的酶标包被板、洗涤液等组分无缺失、无变质,不同批号的试剂禁止混用。
二、器材类准备
核心设备调试:提前调试450nm波长的酶标仪、37℃恒温箱,校准移液器量程,准备好洗瓶或自动洗板机,确认洗板机管路通畅无堵孔。
辅助耗材准备:备好无屑吸水纸、排枪、蒸馏水,提前将所有耗材放置在实验台指定区域,避免实验中途临时取用造成操作中断。
三、预操作验证
正式实验前用空白酶标孔试洗2次,确认每孔加液均匀、无漏液、无串孔,自动洗板机的吸液残留量控制在2μL以内,排除设备故障带来的后续实验误差。
提前将待检样本完成3000rpm离心10分钟的预处理,避免样本中的杂质沉淀带入板孔,增加后续洗刷的除杂负担。