猪ANG-2检测中加样错误的常见原因,主要集中在操作习惯、设备状态、前期准备三大类,具体如下:
前期准备类原因
未提前绘制标准化加样排布图,仅凭记忆加样,中途被打断后无法追溯已加孔位,直接出现错孔、漏加、重复加样问题。
样本未提前按孔位顺序排列,加样时反复翻找样本,打乱操作节奏,大幅提升错加概率。
样本溶血、严重污染未提前剔除,直接上样后不仅干扰反应,还会因样本粘稠导致移液枪吸液不准,引发加样量偏差。
设备与耗材类原因
移液枪长期未校准,实际吸液量与设定值偏差超过2%,直接导致所有孔的加样量系统性偏移。
枪头与移液枪不配套,安装不紧密,吸液时出现漏气,枪头内壁挂液过多,实际打入孔内的液体量不足。
枪头重复使用,内壁残留前一次的样本/试剂,不同样本之间发生交叉污染,直接拉高部分孔的信号值。
操作习惯类原因
加样时枪头浸入液面过深/过浅,吸液速度过快,枪头外壁挂有大量多余液体,实际打入孔内的液体量远超设定值。
不同样本、不同浓度标准品之间不更换枪头,高浓度样本的残留液滴被带到低浓度孔,引发交叉污染。
加样时枪头直接触碰孔底包被层,破坏预先包被的捕获抗体,同时将孔内残留液带到其他孔,引发孔间交叉污染。
整板加样无固定顺序,无序跳孔操作,加样耗时远超10分钟,前后孔反应起始时间差过大,结果一致性严重下降。
样本稀释操作顺序颠倒,本该先加稀释液再加样本,实际先加样本后补稀释液,导致样本局部浓度分布不均,结果重复性极差。