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河豚毒素ELISA试剂盒Ounuo97001
河豚毒素ELISA试剂盒Ounuo97001图片
货号: Ounuo97001
品牌: 欧诺生物
参考价格: 3500元/盒
纯度含量: 99%
等级规格: 一等品
包装: 盒
交货期: 2-3天
产地: 河南郑州
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Ounuo9700199%96T/盒3500
货号:Ounuo97001
品牌:欧诺生物
参考价格:3500
纯度含量:99%
等级规格:一等品
交货期:2-3天
产地:河南郑州
CAS NO:4368-28-9
产品别名:河豚鱼毒素ELISA试剂盒
河豚毒素检测试剂盒
分子式:C11H17N3O8
分子量:319.27
产品介绍

河豚毒素ELISA检测试剂盒使用说明书
货号:Ounuo97001

 
本品采用竞争性酶免检测技术用于鲀鱼类肌肉、肝脏、皮肤等样本中河豚毒素的定量分析,最大可满足96次测试,在做复孔的情况下,一次最多可检测42个样本。


三、样本前处理:
一般来说,组织样本在2-8℃最多保存1-2天,如长时间不用,建议分装成适量小份于-20或-80℃保存,请勿使用反复冻融的样本。【注释:废弃的阳性样本应作为有毒废弃物处理】

准备

(1) 样本提取液

        分别量取甲醇40mL、蒸馏水60mL、冰乙酸0.1mL混匀。

 

(2) 1×样本稀释液

     按1份体积4×样本稀释液和3份体积的蒸馏水混匀。

 

鱼肉、肝脏、鱼皮

(1) 称取2g均质的样本于一合适的容器中,加入10mL样本提取液涡旋30s;

(2) 放置于90℃水浴中10min,期间手摇样本3次;

(3) 自来水降温1min,加入1mL正己烷涡旋30s;4000rpm,离心5min;

(4) 取中间层清液100μL,加入300μL 1×样本稀释液混匀,取50μL点样

稀释倍数:20
四、检测步骤

检测前准备

 所有试剂需回复至室温(在20-25℃下,从试剂盒中取出并放置1-2h);

 检测开始前需准备好所需试剂;

 取出所需体积的试剂,其余放回盒内;

 未使用完的试剂请勿倒回原试剂瓶内,移取每一种试剂需更换吸头,以免交叉污染;

 请不要在通风口、阳光直射下检测,以避免造成微孔微环境差异导致检测失败;

 标准品、阳性样本以及用过的吸头和器皿均应做有毒废弃物处理。

检测前准备

 所有试剂需回复至室温(在20-25℃下,从试剂盒中取出并放置1-2h);

 检测开始前需准备好所需试剂;

 取出所需体积的试剂,其余放回盒内;

 未使用完的试剂请勿倒回原试剂瓶内,移取每一种试剂需更换吸头,以免交叉污染;

 请不要在通风口、阳光直射下检测,以避免造成微孔微环境差异导致检测失败;

 标准品、阳性样本以及用过的吸头和器皿均应做有毒废弃物处理。

 

洗液(1×)配制

取1体积的20×浓缩洗液,加入19体积的去离子水或蒸馏水混匀

检测步骤

(1) 移取50μL河豚毒素标准品至相应微孔中;

(2) 移取50μL样本至相应微孔中;

(3) 移取50μL酶结合物至所有微孔中;

(4) 加入50μL河豚毒素抗体至每一所需微孔中,用手指肚轻轻敲击微孔板架两侧混匀1min;

(5) 室温(20-25℃)孵育30min;

(6) 甩干微孔板,加入300μL 洗液(1×),浸泡5s后倒出洗液,再重复4次,甩干并于无尘布上拍干;

(7) 加入100μL底物,室温(20-25℃)避光孵育15min;

(8) 加入100μL终止液,于450nm下读数

五、结果计算

(1)以logit(B/B0)为y轴,以log(分析物浓度)为x,进行线性拟合。

其中公式如下

logit(B/B0)=k ln⁡〖(concentration)+c〗①

B为标准品或样本对应的吸光度;

B0为零标准品对应的吸光度;

logit(B/B0)=〖ln(〗⁡〖(B/B0)/(1-B/B0))〗;

K为斜率;

C为截距

(2)计算出样本的平均吸光度和样本的B/B0值代入公式①中求出浓度并乘以对应的稀释倍数,即为样本中待测物最终浓度


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