产品介绍 细胞介绍 DC2.4是通过用表达鼠粒细胞-巨噬细胞CSF (GM-CSF)和myc和raf癌基因的逆转录病毒载体转导C57BL/6小鼠的骨髓分离物而产生的永生化鼠树突细胞。DC2.4表现出树突细胞的特征,包括细胞形态和树突细胞特异性标记的表达,以及吞噬和呈递MHC类和II类分子上的外源性抗原的能力。树突细胞(DC)是免疫系统的抗原呈递细胞,在大多数组织中发现,特别是那些与外部环境接触的组织(例如,皮肤和鼻、肺、胃和肠的内层)。最早于1973年描述,树突状细胞的主要功能之一是吞噬外来病原体,并将加工后的抗原呈递至幼稚T细胞,以调节适应性免疫反应。树突状细胞还表达Toll样受体,并帮助调节先天免疫反应。尽管它们分布在大多数组织中,但DC在体内数量很少,并且在体外难以维持。这些困难限制了树突细胞的研究。 细胞特性 1) 来源:C57BL/6小鼠 骨髓 2) 形态:上皮样 贴壁和贴壁不牢(半贴壁半悬浮)混合生长 3) 含量:>1x10^6 细胞数 4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 5)用途:仅供科研使用。 一.培养基及培养冻存条件准备 1) 准备RPMI-1640(推荐iCell-0002)培养基;优质胎牛血清,10%;添加10ng/mL murine GM-CSF;双抗,1%。 注意:该细胞传代时先收集离心悬浮细胞,剩下的贴壁细胞用胰酶消化时间比较长,且很难消化下来。建议用无菌细胞刮刮拭培养表面将细胞刮落,收集离心后同收集的悬浮细胞一起重悬接种到新的培养瓶中。 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 该细胞为贴壁和轻微的贴壁(半贴壁半悬浮)细胞,传代可以参考以下方法: 1. 收集:将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培养箱中消化1-2分钟(该贴壁细胞比较难消化,建议用细胞刮刀刮拭培养表面将细胞刮落,收集离心后同收集的悬浮细胞一起重悬接种到新的培养瓶中),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 3. 将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化(建议细胞刮刀刮拭)下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。 3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。 镜像绮点(上海)细胞技术有限公司( Cellverse Co., Ltd. )是一家专注于研发生产高品质原代细胞、细胞系、干细胞以及相关生物学试剂,并提供专业生物医学技术服务外包的技术公司,公司总部位于上海,其旗下的子公司细新(上海)医疗科技有限公司为《高新技术企业》。 镜像绮点专注于研发生产高品质的人体组织源及动物组织源的原代细胞、细胞系、iPS细胞等产品,提供以及相关的CRO,CMO服务,同时也为客户提供相关培养体系,培养基等试剂。在中国,镜像绮点除与中国科学院细胞库合作外,还与各地医学学院、机构、药企合作,其中包括:上海交通大学医学院,复旦大学医学院。 目前,镜像绮点已经建立起国内先进完备的“人类组织源原代细胞库和细胞系库”两大细胞资源库,各种种属源细胞株(系)500多种,原代细胞包括人源、鼠源、兔源、猪源、羊源以及其它动物源近700多种,3000多株现货,引进了生命科学领域的全套实验设备,建立了先进的生产研发实验室,采用了国际先进的行业技术标准、制造工艺、质检流程,保证了产品出厂的品质,公司同时更注重产品售前与售后的技术服务,着重满足客户的需求与体验。还申请了相关细胞培养试剂等十几项专利产品。正是凭借独有的原代细胞领域原创技术的优势,镜像绮点(上海)细胞技术有限公司,已经成为国内外众多生物医药企业诚信的合作伙伴和坚强的技术后盾。 业务范围
公司提供但不限于以下产品和技术服务: 一、原代细胞服务 |
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