产品属性

产品信息

细胞简介：小鼠巩膜成纤维细胞分离自巩膜组织，巩膜是眼球壁的主要组成之一。是眼球纤维膜的后5/6部分。前方联接角膜，后方与视神经的鞘膜延续。巩膜在视神经穿出部附近最厚，愈前愈薄，在肌腱附着处又复增厚。其与角膜交界处，外面有环形的角膜沟，深部有巩膜静脉窦。小儿的巩膜为浅蓝色，成年为白色，老年因脂肪沉着而带黄色。巩膜结构坚韧，有支持和保护眼内组织的作用。成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的巩膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介：实验室分离的小鼠巩膜成纤维细胞采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的小鼠巩膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传1-3代左右

消化液：0.25%胰蛋白酶小鼠巩膜成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的**培养状态。
细胞培养技术

培养基配方：推荐使用含B-27 Supplement、EGF、bFGF等生长因子的专用培养基，添加青霉素和链霉素防止污染

培养条件：37℃、5% CO₂环境培养，气相成分为95%空气和5%二氧化碳

传代方法：80-90%汇合时用0.25%胰蛋白酶-EDTA消化1-2分钟，按1:2比例传代

冻存保存：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后转入液氮长期保存

质量控制和检测

实验室分离的细胞需通过以下质量检测：

免疫荧光鉴定：Nestin标志物阳性率≥90%

无菌检测：确保不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌和真菌等污染物

细胞活性：复苏后存活率应≥80%

形态学检查：培养细胞应呈现典型神经前体细胞形态

产品规格和使用说明

产品规格：通常以5×10⁵cells/T25培养瓶形式提供

运输方式：可选择冻存管干冰运输或培养瓶常温运输

接收处理：

冻存细胞：立即复苏或转入液氮保存

培养瓶：静置2-4小时后换液

注意事项：

仅限科研用途

建议在收到细胞后3天内反馈状态

定期拍照记录细胞生长情况

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