细胞简介

小鼠真皮毛乳头细胞分离自皮肤毛囊组织；毛囊是表皮细胞连续形成的袋样上皮。其基底是真皮凹进的真皮毛乳头，中心是一根毛发，立毛肌的一侧斜附在毛囊壁上，附着点的上方为皮脂腺通入毛囊的短颈，毛囊在皮肤表面的开口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下组织中，毛囊向下伸入真皮约有一厘米深度，它是由包绕毛发与表皮相连的上皮鞘，以及皮脂腺和立毛肌所组成的一个结构比较复杂的器官附件组织。毛囊实际上是由结缔组织和上皮两部分所组成，除了具有结缔组织和血管的真皮乳头(毛乳头)外，毛囊其余部分都是由表皮细胞分化而来。真皮毛乳头细胞位于毛囊基底部，是一类成纤维细胞。在毛囊发育早期，真皮细胞向单层上皮细胞发出**真皮信号，刺激上皮局部形成毛基板。随后毛基板细胞向下方的真皮发出**表皮信号，诱导其形成有成纤维细胞组成的凝集细胞团。在此过程中，毛母质细胞逐渐包裹凝集细胞团，形成成熟的真皮毛乳头细胞。作为毛囊中的重要细胞群，真皮毛乳头细胞的分子机制和临床应用正在被逐渐认识和解析。

方法简介：实验室分离的小鼠真皮毛乳头细胞采用胶原酶 - 中性蛋白酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

质量检测：实验室分离的小鼠真皮毛乳头细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件PLL(0.1mg/ml)

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：梭形、多角形

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%胰蛋白酶小鼠真皮毛乳头细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的**培养状态。

细胞质量检测

活率检测：采用台盼蓝染色法，活细胞拒染，死细胞被染成蓝色，活率应≥90%。

纯度鉴定：通过免疫荧光染色、流式细胞术等方法，检测细胞特异性标志物，确保细胞纯度≥95%。

生物学功能检测：根据细胞类型进行相应功能检测，如肝细胞的白蛋白分泌功能、免疫细胞的增殖与杀伤功能等。

培养条件与培养基配置

推荐使用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基（或MEM培养基），添加青霉素-链霉素双抗。培养条件为37℃、5% CO₂及70%-80%湿度环境，气相成分为95%空气和5%二氧化碳。冻存液需现配现用（90%血清+10%DMSO），液氮保存。细胞传代周期为2-3天，消化时采用0.25%胰蛋白酶-EDTA，传代比例建议1:2至1:5。

细胞处理操作规范

复苏：将冻存管37℃水浴快速解冻，离心后弃上清，用培养基重悬并接种至培养瓶，次日换液；

传代：80%-90%融合度时消化，离心后按比例分瓶；

冻存：生长状态良好时收集细胞，冻存密度不低于1×10⁶/ml。运输可选择冻存管干冰运输或T25培养瓶常温运输，后者需观察贴壁率并及时传代。

质量控制与应用领域

细胞需通过形态学（梭形贴壁生长）和标志物（波形蛋白阳性）双重验证，提供配套鉴定报告。在研究中可用于：

体外药物模型评估（如COPD模型中结缔组织生长因子CTGF的高表达分析）；

基因功能调控（特定基因敲除或过表达实验）；

分子机制研究（如RNA剪接、Western Blot等）。注意仅限科研用途，禁止临床应用。
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