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细胞简介：兔下丘脑神经元细胞分离自下丘脑；下丘脑又称丘脑下部，位于大脑腹面、丘脑的下方，是调节内脏活动和内分泌活动的较高级神经中枢所在。下丘脑自前向后可分三部﹐即前部（又名视前区和视上区）﹑中部（结节区）和后部（乳头体区）。下丘脑具有许多细胞核团和纤维束﹐与中枢神经系统的其它部位具有密切的相互联系。它不仅通过神经和血管途径调节脑垂体前﹑后叶激素的分泌和释放﹐而且还参与调节自主神经系统﹐如控制水盐代谢﹑调节体温﹑摄食﹑睡眠﹑生殖、内脏活动以及情绪等。下丘脑神经元与来自其他部位的神经纤维有广泛的突触联系，可以接受很多神经冲动，为内分泌系统和神经系统的中心。它们能调节垂体前叶功能，合成神经垂体激素及控制自主神经和植物神经功能。故提取下丘脑神经元进行体外培养，建立下丘脑神经元体外实验平台具有重要意义。

方法简介：实验室分离的兔下丘脑神经元细胞采用胰蛋白酶消化法结合神经元专用培养基培养、化学试剂抑制法筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的兔下丘脑神经元细胞经β-Tubulin-Ⅲ免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件PLL（0.1mg/ml）

培养基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：神经元细胞样

传代特性：属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液：0.25%胰蛋白酶兔下丘脑神经元细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的**培养状态。
培养基与环境

推荐培养基：含FBS（胎牛血清）、内皮细胞生长添加剂、青霉素/链霉素的专用内皮细胞培养基，如89% 1640培养基+10% FBS+1%双抗 。

培养条件：气相为空气95%、CO₂ 5%，温度37℃ 。

包被要求：培养瓶需经PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%）包被 。

收货处理步骤

1. 消毒与观察 75%酒精喷洒培养瓶表面消毒，显微镜下观察细胞状态及有无污染，拍照记录 。

2. 平衡环境 放入37℃培养箱平衡2-3小时，使细胞适应温度和CO₂浓度 。

3. 培养基处理 若细胞密度＜80%，直接补加5-6ml培养基继续培养；若＞80%，可消化传代 。

4. 传代方法 1:2~1:4比例传代，2-3天换液一次，使用0.25%胰蛋白酶消化 。

传代与冻存

传代特性：原代细胞体外培养周期有限，通常可传2-3代（部分方法显示可传18代以上，需以具体产品说明为准） 。

冻存液：推荐含 DMSO 的血清冻存液（如90% FBS+10% DMSO），程序降温后保存于液氮。

注意事项

质量控制：细胞传代比例建议1:2至1:3，避免过度消化。

污染预防：严格无菌操作，定期检测支原体。

代次限制：原代细胞建议使用前5代，以保持功能稳定性。

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