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土壤锰过氧化物酶(S-Mnp)检测试剂盒(微量法)
土壤锰过氧化物酶(S-Mnp)检测试剂盒(微量法)图片
包装: 100管/48样
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产品介绍

锰过氧化物酶(EC1.11.1.13)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,主要存在于担子菌中,属于木质素降解酶系,能有效的降解木质素及废水和土壤中比较难降解的氯化物,叠氮化合物、DTT,多环芳烃等。锰过氧化物酶在Mn2+存在的条件下,将愈创木酚氧化为四邻甲氧基连酚,在465nm有特征吸收峰。

产品组成:

试剂名称规格保存条件
试剂一液体12ml×1瓶4℃
试剂二液体2ml×1支4℃
试剂三液体4ml×1瓶4℃避光
试剂四液体2ml×1支4℃

需自备的仪器和用品:

天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、震荡仪、甲苯。操作步骤:


对照管测定管
土样(mg)2020
甲苯(μL)1515
25℃,静置15min。

试剂一(μL)140120
试剂二(μL)
20
试剂三(μL)4040
试剂四(μL)2020
充分混匀,于30℃反应10min,于10000rpm,4℃离心10min,取180μL于微量石英比色皿/96孔板于微量石英比色皿/96孔板,蒸馏水调零,测定465nm处吸光值,记为A对照管和A测定管,△A=A测定管- A对照管。

酶活计算公式:

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

酶活性定义:每克土壤每分钟氧化1nmol愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。

S-MnP活性(nmol/min/g)=△A/(ε×d)×V反总÷W÷T=8.3×△A÷W

ε:愈创木酚摩尔消光系数:12100L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,200μL;W:样本质量,g;T:反应时间,10min。

b.用96孔板测定的计算公式如下

酶活性定义:每克土壤每分钟氧化1nmol愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。

S-MnP活性(nmol/min/g)=△A/(ε×d)×V反总÷W÷T=16.6×△A÷W

ε:愈创木酚摩尔消光系数:12100L/mol/cm;d:比色皿光径,0.5cm;V反总:反应总体积,200μL;W:样本质量,g;T:反应时间,10min。

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