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土壤过氧化物酶(S-POD)活性检测试剂盒(微量法)
土壤过氧化物酶(S-POD)活性检测试剂盒(微量法)图片
包装: 100管/48样
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产品介绍

注意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

S-POD主要来源于土壤微生物,能够氧化土壤有机物质产生过氧化物,在腐殖质的形成过程中具有重要作用。

S-POD催化有机物质氧化成醌,后者在430nm有特征光吸收。

产品内容:

试剂一:粉剂×1瓶,临用前每瓶加入10ml蒸馏水,用不完的试剂仍4℃保存;

试剂二:液体2ml×1瓶,4℃保存;

试剂三:液体5ml×1瓶,4℃保存;

试剂四:乙醚50ml×1瓶,4℃保存;(自备)

标准品:液体10ml×1瓶,4℃保存,相当于每ml乙醚相中含有0.1mg/ml紫色没食子素。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、乙醚(不允许快递)、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤:

1、样品处理:新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30-50目筛。

2、标准品处理:将标准品用0.5 mol/L HCl溶液稀释至0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0.01、0mg/ml。分光光度计预热30min以上,调节波长至430nm,0mg/ml管调零,测定标准管的吸光度,根据吸光度(x)和浓度(y)建立标准曲线。

3、测定步骤:

试剂名称测定管无基质管
风干土样(g)0.020.02
蒸馏水(μL)
20
试剂一(μL)100100
试剂二(μL)20
震荡混匀,30℃恒温培养1h
试剂三(μL)5050
试剂四(μL)430430
振荡数次室温静置30min,取0.2ml上层液于430nm处测定吸光值A。计算ΔA=A测定管-A对照管。(若使用分光光度计则使用试剂四调零)
4、S-POD活力计算:

根据标准曲线,将△A(x)带入公式中计算出y值(mg/ml)。

单位的定义:每天每g土样中产生1mg紫色没食子素定义为一个酶活力单位。

S-POD活力(U/g土样)=y×V提取相÷W÷T=516×y

T:反应时间,1h=1/24d;V提取相:提取相总体积0.43ml;W:样本质量,0.02g。

注意事项:

每个样品均需做无基质管。

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