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CD40免疫组化试剂盒
CD40免疫组化试剂盒图片
型号:48T/96
品牌:一研
参考价格:1300-2300
纯度含量:98
包装:
产地:进口、国产


产品名称
免疫组化试剂盒
CD40
产品介绍

CD40 免疫组化试剂盒

该试剂盒以 HRP 标记的链霉亲和素复合物(HRP Streptavidin Conjugate,

HRP-SA)为基础,可用于检测血液,细胞、组织内的特异性 CD40 抗原。该试剂盒

具有灵敏度高、特异性强、定性定位准确、背景清晰。在所用的 CD40 一抗与相

应靶抗原结合后,用生物化二抗与一抗特异性结合,最后加入 HRP-SA,形成抗

原—特异一抗—生物素化二抗—HRP-SA 复合物,显微镜下观察成像。

试剂盒所含试剂: 

试剂 A 通透液:0.1% Triton-X 100   10 mL(选用) 

试剂 B 封闭缓冲液(封闭用) 20 mL 

试剂 C (原装进口分装)已稀释的即用型 CD40 一抗(2.5ml) 

试剂 D (原装进口分装)生物素化羊抗兔 IgG 1 支 

(浓度 1.5 mg/mL,稀释比为 1:300~1:500)50 μL+抗体稀释液 20ml 

试剂 E HRP-SA 复合物 1 支(浓度 1 μM,稀释比 1:50~1:200)100 μL 

试剂 F DAB 显色液 5ml 

用户自备试剂: 

1. 10mM TBS(pH7.2~7.4) 

三羟基氨基甲烷 1.21g 

氯化钠 7.6g 

加蒸馏水 800mL,浓盐酸调 pH 值至 7.2~7.4,最后定容至 1000mL 

TBS-T:TBS+Tween 20(0.05%体积比) 

2.抗原修复液(依检测抗原不同而选择不同的修复液) 

10mM pH6.0 柠檬酸缓冲液 

柠檬酸 0.38g 

柠檬酸三钠 2.45g 

加蒸馏水 900mL,浓盐酸调 pH 值至 6.0,最后定容至 1000mL 

或:0.5M EDTA 修复液(pH8.0) 

EDTA·2H2O 186.1g 

加蒸馏水 700mL,用 10mM NaOH 调 pH 值至 8.0,最后定容至 1000Ml 

3. 缓冲甘油封固剂 10 mL 

4. Tween 20 5 mL
石蜡包埋组织切片免疫染色

实验步骤(建议方案 ): 

石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度 

1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr; 

2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次

10 min; 

3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%

乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min; 

4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温

度达到 98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×

2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附 1)* 注:有些抗原勿需修复,

直接进入第 5 步封闭。 

5.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 30 min; 

6.加一抗:滴加用试剂 C(即用型一抗),37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜; 

7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min); 

8.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 10 min; 

9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂 D),37℃湿盒中孵育

30 min; 

10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min); 

11.封闭: 滴加试剂 Tween 20,37℃湿盒孵育封闭 20 min; 

12.加 HRP-SA: 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E(1:50~200,终浓度 5~20 nM),37

℃湿盒中孵育 30 min; 

13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min); 

14.显色:应用 DAB 溶液(试剂 F)显色; 

15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明; 

16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片


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地址: 上海丰贤大亭公路1450号
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