黄曲霉毒素B1（AFB1）ELISA检测试剂盒
货号：Ounuo92002
    黄曲霉毒素B1试剂盒，采用间接竞争ELISA法，可用于检测植物油脂、花生油、花生饼等样品中的黄曲霉毒素B1的含量。
标准品或样品中黄曲霉毒素B1（以下简称AFB1），与预包被在微孔中的抗原竞争结合溶液中黄曲霉毒素B1抗体，经酶结合物反应，洗涤除去未反应试剂，再经底物显色；标准品或样品中黄曲霉毒素B1含量与其吸光度呈负相关

1.样本前处理（植物油脂、花生饼、花生粕）

需要但未提供的试剂和器皿如下：

(1)无水甲醇，分析纯

(2)正己烷，分析纯

(3)二甲基亚砜，分析纯

(4)去离子水（可用娃哈哈纯净水代替）

试剂配制

样本提取液：量取无水甲醇350mL，加去离子水150mL混匀备用

植物油脂

1）称取1.0±0.01g油样于10mL离心管中，加入5mL样本提取液，2500rpm涡旋振荡5 min；

2）2600g离心力，离心3min；

3）取步骤2）上层溶液0.2mL，加入0.4mL样本稀释液Ⅰ，再加入0.9mL正己烷，涡旋混匀10-30s（精炼油10s，基质复杂的油可延长至30s），静置分层，弃上层，取下层溶液用于检测。

样本稀释倍数：1

花生饼、花生粕

1）称取2.0±0.01g样本于50mL离心管中，加入6mL去离子水，2500rpm涡旋振荡3min，再加入12mL无水甲醇和2mL二甲基亚砜，2500rpm涡旋振荡5min；

2）2600g离心力，离心3min；

3）取步骤2）上层溶液0.2mL，加入0.4mL样本稀释液Ⅰ，涡旋混匀；

4）取步骤3）下层溶液0.05mL，加入0.45mL 样本稀释液Ⅱ，涡旋混匀，待检测。

样本稀释倍数：20

2.操作步骤

实验前，请将检测试剂盒从2-8℃冰箱中取出，于室内温度20-28℃下平衡1小时！

试剂配制

洗涤液（1×）：取1体积的20×浓缩洗液，加入19体积的去离子水或蒸馏水混匀，备用，可按需配制

1）取出适量平衡后的板条，其余放回铝膜袋中；

2）依次加50μL标准品/样本于相应微孔中；加50μL酶结合物和50μL抗体至所有微孔；轻敲板架；

3）盖上板贴，于20-28℃条件下孵育15分钟；倒出微孔中液体；

4）将洗涤液注满微孔浸泡15s倒出，重复4次，共计5次；并于拍板布上尽可能干的拍出孔内液体；

5）加100μL底物至微孔中，轻敲板架，盖上板贴，于20-28℃下，孵育5分钟；
6）揭开板贴，不要倒出液体，直接加100μL终止液至微孔中，轻敲板架，于450/630nm波长下，读数。