庆大霉素ELISA检测试剂盒
货号：Ounuo99002

本品采用竞争性酶免检测技术用于牛奶、组织（牛/猪/鸡/火鸡）以及奶粉等样本中庆大霉素的定量分析，最大可满足96次测试，在做复孔的情况下，一次最多可检测42个样本。

一、检测原理

  基于竞争性免疫检测原理：庆大霉素与预包被在板上的庆大霉素蛋白偶联物竞争结合有限的抗庆大霉素的抗体，然后加入酶结合物反应，形成酶结合物—抗庆大霉素抗体—庆大霉素蛋白偶联物复合物，洗涤除去未结合的反应物，经TMB底物显色产生蓝色产物，加终止液后，产物由蓝色转变为黄色，其在450nm下有最大吸收峰。样本中庆大霉素含量与样本的吸光度呈负相关。

二、试剂盒特性

检测限：

l  组织（牛/猪/鸡/火鸡）：2.5ppb

l  牛奶：10ppb

l  组织/细胞上清：200ppb

l  奶粉：5ppb

定量限：

l  组织（牛/猪/鸡/火鸡）：5ppb

l  牛奶：15ppb

l  组织/细胞上清：500ppb

l  奶粉：10ppb

三、检测步骤

检测前准备

l  所有试剂需回复至室温（在20-25℃下，从试剂盒中取出并放置1-2h）;

l  检测开始前需准备好所需试剂；

l  取出所需体积的试剂，其余放回盒内；

l  未使用完的试剂请勿倒回原试剂瓶内，移取每一种试剂需更换吸头，以免交叉污染；

l  请不要在通风口、阳光直射下检测，以避免造成微孔微环境差异导致检测失败

洗液（1×）配制

取1体积的20×浓缩洗液，加入19体积的去离子水或蒸馏水混匀

检测步骤

(1)    移取50μL庆大霉素标准品至相应微孔中；

(2)    移取50μL样本至相应微孔中；

(3)    移取50μL酶结合物至每一所需微孔中；

(4)    加入50μL庆大霉素抗体至每一所需微孔中，用手指肚轻轻敲击微孔板架两侧混匀1min；

(5)    室温（20-25℃）孵育30min；

(6)    甩干微孔板，加入300μL 洗液（1×），浸泡5s后倒出洗液，再重复4次，甩干并于无尘布上拍干；

(7)    加入100μL底物，室温（20-25℃）避光孵育15min;

(8)    加入100μL终止液，于450nm下读数