河豚毒素ELISA试剂盒Ounuo97001
包装与价格：
产品名称 河豚鱼毒素ELISA试剂盒 河豚毒素检测试剂盒 产品介绍
河豚毒素ELISA检测试剂盒使用说明书 三、样本前处理： 准备 (1) 样本提取液 分别量取甲醇40mL、蒸馏水60mL、冰乙酸0.1mL混匀。
(2) 1×样本稀释液 按1份体积4×样本稀释液和3份体积的蒸馏水混匀。
鱼肉、肝脏、鱼皮 (1) 称取2g均质的样本于一合适的容器中，加入10mL样本提取液涡旋30s; (2) 放置于90℃水浴中10min，期间手摇样本3次； (3) 自来水降温1min，加入1mL正己烷涡旋30s；4000rpm，离心5min； (4) 取中间层清液100μL，加入300μL 1×样本稀释液混匀，取50μL点样 稀释倍数：20 检测前准备 所有试剂需回复至室温（在20-25℃下，从试剂盒中取出并放置1-2h）; 检测开始前需准备好所需试剂； 取出所需体积的试剂，其余放回盒内； 未使用完的试剂请勿倒回原试剂瓶内，移取每一种试剂需更换吸头，以免交叉污染； 请不要在通风口、阳光直射下检测，以避免造成微孔微环境差异导致检测失败； 标准品、阳性样本以及用过的吸头和器皿均应做有毒废弃物处理。 检测前准备 所有试剂需回复至室温（在20-25℃下，从试剂盒中取出并放置1-2h）; 检测开始前需准备好所需试剂； 取出所需体积的试剂，其余放回盒内； 未使用完的试剂请勿倒回原试剂瓶内，移取每一种试剂需更换吸头，以免交叉污染； 请不要在通风口、阳光直射下检测，以避免造成微孔微环境差异导致检测失败； 标准品、阳性样本以及用过的吸头和器皿均应做有毒废弃物处理。
洗液（1×）配制 取1体积的20×浓缩洗液，加入19体积的去离子水或蒸馏水混匀 检测步骤 (1) 移取50μL河豚毒素标准品至相应微孔中； (2) 移取50μL样本至相应微孔中； (3) 移取50μL酶结合物至所有微孔中； (4) 加入50μL河豚毒素抗体至每一所需微孔中，用手指肚轻轻敲击微孔板架两侧混匀1min； (5) 室温（20-25℃）孵育30min； (6) 甩干微孔板，加入300μL 洗液（1×），浸泡5s后倒出洗液，再重复4次，甩干并于无尘布上拍干； (7) 加入100μL底物，室温（20-25℃）避光孵育15min; (8) 加入100μL终止液，于450nm下读数 五、结果计算 （1）以logit(B/B0）为y轴，以log（分析物浓度）为x，进行线性拟合。 其中公式如下 logit(B/B0)=k ln〖(concentration)+c〗① B为标准品或样本对应的吸光度； B0为零标准品对应的吸光度； logit(B/B0)=〖ln(〗〖(B/B0)/(1-B/B0))〗; K为斜率； C为截距 （2）计算出样本的平均吸光度和样本的B/B0值代入公式①中求出浓度并乘以对应的稀释倍数，即为样本中待测物最终浓度
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