染料法支原体污染实时定量PCR试剂盒

Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma contamination

货号：Myco-qs-20，规格：20个反应

货号：Myco-qs-20，规格：20个反应

货号：Myco-qs-20，规格：20个反应

储存：-20度，避光保存，保质期一年。避免反复冻融。

试剂盒特点：

1，    对柔膜菌纲（包括支原体、螺原体和无胆甾原体）有极强的特异性，与柔膜菌纲以外的其他基因组无交叉反应。

2，    灵敏度高，最低可检出反应液中2-4个基因组。

3，    使用热启动的Taq酶，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。

4，    带有阳性对照样品，可用于检验试剂盒有效性，也可用于验证待测样品中是否含有PCR抑制剂。

5，    带有ROX参比染料，帮助校正加样误差和管间差异。

支原体污染是细胞培养和生物制品生产过程中长期存在的棘手问题。这类缺乏细胞壁的微小微生物能够穿透常规除菌过滤器，在培养系统中隐秘增殖，不仅干扰实验结果的可重复性，更可能导致疫苗等生物制品的质量隐患。传统检测方法如培养法需耗时数周，而PCR技术的引入彻底改变了这一局面。

本试剂盒采用SYBR Green I染料法实时荧光定量PCR技术，通过特异性扩增支原体高度保守的16S rRNA基因序列，在2小时内即可完成全流程检测。SYBR Green染料与双链DNA产物的特异性结合特性，使得反应过程中荧光信号的积累与目标核酸量成正比，既保证了检测灵敏度（最低检出限达10拷贝/反应），又避免了探针法对特定序列的依赖。扩增结束后通过熔解曲线分析，还能根据产物Tm值差异进行初步的物种鉴别，为污染溯源提供额外信息。

本试剂盒通过针对支原体物种间16S rRNA基因的保守区段设计通用引物，可同步检测包括发酵支原体、猪鼻支原体等常见污染源在内的超过150种支原体，以及部分螺原体和无胆甾原体，与亲缘关系较近的革兰氏阳性菌，如链球菌、梭菌、乳杆菌等，没有交叉反应，在检测范围和特异性方面达到欧洲药典的要求。欧洲药典提及的所有支原体均在本试剂盒的检测范围内。灵敏度方面，最低检测值可以达到每个反应2-4个基因组，达到欧洲药典要求的10 CFU/mL的最低检测值。本试剂盒也可作为支原体通用检测试剂盒使用，但不适用于嗜血支原体的检测。

注意事项：

1，    本产品仅限于科研使用，不作诊断用途。

2，    操作过程中应注意防范样品之间的串联污染。