样本处理
血清/血浆:室温凝固后离心(2000×g 20分钟),避免反复冻融。
组织匀浆:按1:9重量体积比与PBS混合,超声破碎后离心取上清。
实验步骤
加样:每孔加入100μl标准品或样本,37℃孵育90分钟。
洗板:洗涤5次,每次30秒,彻底拍干。
显色:加入TMB底物避光反应,终止后450nm测吸光度。
注意事项
试剂平衡:使用前需室温静置30分钟。
避免污染:不同样本使用独立枪头,加样顺序按说明书进行。
数据验证:双孔检测,确保CV值≤10%。