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人3-硝基酪氨酸ELISA检测试剂盒试剂准备
2020.05.13   点击257次

人3-硝基酪氨酸ELISA检测试剂盒试剂准备

1. 试剂回温:首先在实验前 30 min 将试剂盒,待测样本放置于室温下,浓缩洗涤液如出现结晶,请放入 37℃温浴直到结晶全部溶解。

2. 配制洗涤液:预先计算好稀释后的洗涤液使用体积,然后用双蒸水或去离子水将 20 倍浓缩洗涤液稀释成 1 倍应用液,未用完的浓缩洗涤液放入 4℃冰箱保存。

3. 标准品梯度稀释:加入标准品/样本稀释液(SR1)1ml至冻干标准品中,静置15分钟待其完全溶解后轻轻混匀(浓度为2000pg/ml),然后在1000pg/ml及以后各浓度离心管中分别加入500ul标准品/样本稀释液(SR1)。再按照以下浓度进行2倍稀释:1000、500、250、125、62.5、31.25pg/ml进行稀释。2000pg/ml作为标准曲线最高点浓度,0 pg/ml(即只加入标准品/样本稀释液(SR1))作为标准曲线空白对照。复溶过的标准品原液(2000pg/ml)未用完的应废弃或根据需要按照一次用量分装,并将其贮存在-20~-80℃冰箱。

4. 生物素化抗体工作液:预先计算好试验所需用量,用检测稀释液(SR2)将100倍抗体浓缩液稀释成1倍应用工作液(稀释前充分混匀),请在30分钟内加入到反应孔中。

5. 酶结合物工作液:按每次试验所需用量配制,用酶结合物稀释液(SR3)将100倍浓缩酶结合物稀释成1倍应用工作液(稀释前离心),请在30分钟内使用。

6. 洗涤方法:

 自动洗板:甩尽酶标板孔中液体,在厚迭吸水纸上拍干,注入洗涤液为 300ul/孔,注与吸出间隔为 30 秒,洗板 5 次。

 手工洗板:甩尽酶标板孔中液体,在厚迭吸水纸上拍干,用洗瓶加入洗涤液300ul/孔,静止 30 秒后甩净酶标板孔中液体,在厚迭的吸水纸上拍干,洗板 5 次。




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